《Star☆Twinkle光之美少女》是由东映动画制作的系列魔法少女动画作品《光之美少女》的第十六部系列作品，属第十四代光之美少女。在距离地球非常遥远的“星空界”中心，存在着圣域“星之神殿（スターパレス）”以及十二星座的星之公主们，她们的力量维持着宇宙间的平衡。然而某天，星之公主们遭到不明人士袭击，变成了12支“公主星光彩色笔”散落在宇宙中。再这样下去，星球将会毁灭，连地球和宇宙都会被黑暗所吞噬…...